Desmond回來了，這一次，他潛入了一名文藝復興時代祖先的記憶中。本次《刺客信條2》的背景設定在1486年的意大利文藝復興時代，地點在威尼斯，佛羅倫薩以及托斯卡納。玩家依舊是操作Desmond的祖先，本次的祖先名叫Ezio Autitore da Firenze。Ezio出身貴族，但是沒多久他就被捲入了他人對他家族的陰謀中，於是他決定找陰謀策劃者復仇。在Ezio的任務中，他將要面對強大的Grimaldi家族，這個家族也就相當於今天黑手黨的前身。除了要對抗Grimaldi家族的成員，我們知道聖殿騎士團也會回來。作為敵方重要角色的Carno Grimaldi，在威尼斯當地可謂有權有勢。很顯然，這個傢伙身邊保護重重，而他對自己過於自信也是他失敗的原因。
